محیط کشت ام آر وی پی براث برای انجام دو تست MR و VP جهت شناسایی باکتریهایی مانند کلبسیلا، سالمونلا و … بکار می رود. در هنگام خرید محیط کشت میکروبی، توجه به برند و شرکت سازنده محیط کشت دارای اهمیت فراوان است. دو شرکت مرک آلمان و کیولب کانادا از جمله شرکت های معتبر سازنده این محصول به شمار می رود. محیط کشت ام آر وی پی براث از برند مرک میلیپور آلمان از جمله محیط کشت های پرکاربرد برای انواع تست های میکروبی است.

طیف کاربردی این محیط به حدی است که هر مرکز معتبر فروش مواد آزمایشگاهی باید آن را داشته باشد.

مشخصات محیط کشت ام آر وی پی براث

محیط کشت ام آر وی پی براث (MR-VP broth) یک محیط کشت مایع است که برای انجام دو تست MR و VP استفاده می شود. این محیط کشت حاوی گلوکز است که توسط باکتری برای تولید انرژی مورد استفاده قرار میگیرد.

باکتری های مختلف (یا گونه های مختلف یک باکتری) برای تخمیر گلوکز مسیرهای متفاوتی را بکار میگیرند. از جمله این مسیرها می توان به مسیر تخمیر اسیدی (MR مثبت) و مسیر تخمیر بوتاندیول (VP مثبت) اشاره نمود.

در مسیر تخمیر اسیدی معمولا باکتری ترکیبی از چند اسید را تولید می کند که در گونه های مختلف باکتریایی متفاوت است. رایجترین این اسیدها شامل اسید لاکتیک، استیک اسید، سوکسینیک اسید و فرمیک اسید است.

باکتری با تولید این اسیدها در محیط کشت ام آر وی پی براث بر بافر فسفات غلبه می کند و Ph محیط را به کمتر از ۴.۴ میرساند. در این حالت با اضافه نمودن معرف متیل رد رنگ محیط به قرمز تغییر می کند.

در مسیر تخمیر بوتاندیول، باکتری گلوکز را تخمیر می کند اما به جای اسیدهای آلی، محصول نهایی ۲،۳ بوتاندیول است. در این حالت ما می توانیم با افزودن معرفهای VP1 و VP2 پیش ساز این ماده یعنی استوئین (acetoin) را شناسایی نماییم.

کاربرد محیط کشت ام آر وی پی براث

محیط کشت ام آر وی پی براث غالبا برای شناسایی و تفکیک باکتریهای عضو خانواده انتروباکتریاسه مورد استفاده قرار میگیرد. سویه های مختلف انتروباکتر، کلبسیلا، اشرشیاکلی، پروتئوس، سالمونلا، یرسینیا و کلیفرم ها می توانند توسط تست MR-VP در محیط کشت ام آر وی پی براث مورد تفکیک و شناسایی قرار گیرند.

نحوه استفاده

ابتدا نمونه باکتریایی در محیط کشت ام آر وی پی براث کشت داده می شود. بعد از انکوباسیون و رشد باکتری، بخشی از محیط به به یک لوله آزمایش استریل منتقل میگردد.

برای تست MR به یکی از لوله ها معرف متیل رد اضافه میگردد. در صورتی که رنگ محیط به قرمز تغییر نماید باکتری MR مثبت است و از مسیر تخمیر اسیدی استفاده می کند. اگر Ph محیط بالای ۶ باشد رنگ محیط بعد از افزودن معرف زرد رنگ می گردد و باکتری MR منفی است.

تست ام ار (MR).

برای تست VP به لوله دوم ابتدا معرف VP1 (آلفا نفتول) و سپس معرف VP2 (KOH) اضافه میگردد و به شدت تکان داده می شود.

اگر رنگ محیط کشت ام آر وی پی براث حاوی باکتری صورتی گردد، باکتری VP مثبت است و از مسیر تخمیر بوتان دیول استفاده می کند. اما اگر رنگ محیط به سبز تیره مایل به زرد تغییر نماید جواب منفی و باکتری VP منفی است.

تست .VP